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      細胞中液泡系活體染色

      發(fā)布時間: 2023-01-12  點擊次數(shù): 1729次

      簡介

      細胞中液泡系活體染色實驗是利用中性紅(neutrol red)是液泡系的專一性活體染色劑的特性,在細胞處于生活狀態(tài)時,只將液泡系染成紅色,細胞質(zhì)和細胞核不被染色。

      原理

      細胞中液泡系活體染色實驗的基本原理是動物細胞內(nèi)由單層膜包裹的小泡都屬于液泡系,包括高爾基復合體、溶酶體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、轉(zhuǎn)運泡、吞噬泡等。軟骨細胞內(nèi)含有較多的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達的高爾基復合體,能合成與分泌軟骨黏蛋白及膠原纖維等,因而液泡系發(fā)達。中性紅(neutrol red)是液泡系的專一性活體染色劑,在細胞處于生活狀態(tài)時,只將液泡系染成紅色,細胞質(zhì)和細胞核不被染色。

      材料與儀器

      器材:
      解剖器材、蠟盤、載玻片、蓋片、吸管、吸水濾紙、普通光學顯微鏡、蟾蜍。
      試劑:

      ① 1/3000 中性紅;

      ② 0.65% Ringer 液(兩棲動物用)(氯化鈉,0.65 g;氯-化-鉀,0.042 g;氯化鈣,0.025 g;蒸餾水,100 ml。)

      步驟

      細胞中液泡系活體染色實驗的基本過程可分為如下幾步:
      A 取蟾蜍 1 只,搗毀脊髓法處死,將其腹面朝上固定于蠟盤上,剪開腹腔,取胸骨劍突軟骨最薄部分的一小片,置于載片上。
      B 滴加 1/3000 中性紅,染色 15 min。
      C 濾紙吸去染液。
      D 滴加 0.65% Ringer 液,蓋上蓋片,用濾紙從蓋片側(cè)面吸取多余液體。
      E 鏡下觀察。

      注意事項

      1 為便于觀察,在取胸骨劍突時,盡量取較薄部位。

      2 本實驗因是活體染色,在實驗的整個過程中,應(yīng)注意保持標本的活體狀態(tài),特別在取材時應(yīng)做到準確、快速。


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